Après un baccalauréat C obtenu, et une formation passée par les cours Florent, Barbara Tissier multiplie les activités artistiques. Passionnée de théâtre, elle s'ouvre une carrière avec quelques rôles tels que « Poil de carotte », « La reine des neiges », « Pierrot ou les secrets de la nuit »…Mais elle sourit également au cinéma, où Jean-Luc Godard la choisit pour un rôle dans Passion, elle joue dans Le Silence Du Scarabée de Catherine Beuve-Mery, et dans Le Gardien de Jean-Michel Scarpa. Quant à Jean-Paul Roux, elle le rencontre pour une collaboration sur le téléfilm « Le cerf-volant ».
Elle prête également sa voix pour des films publicitaires et pour des longs-métrages au cinéma. Elle double ainsi la voix de Fiona dans le célébrissime Shrek et Jessie dans Toy Story 2. Mais elle double aussi Cameron Diaz dans Mary À Tout Prix, et Christina Ricci dans Sleepy Hollow.
En 2006, Barbara Tissier fait partie de la version française d'Astérix Et Les Vikings, doublant SMS.