Née le 24 juin 1966 à Paris. Florence Thomassin passe par différente formation artistique comme le cours Véra Gregh, le Studio 34 et le cours Pygmalion. Elle débute sa carrière en tant que danseuse de cabaret à l’Alcazar de 1986 à 1989. Au cinéma, c’est par les moyens métrages qu’elle parvient à se faire connaître (
Ainsi Soient-elles de Patrick Alessandrin en 1995). Elle y joue aux côtés de Vincent CAssel et Amira Casar. Dans
Elisa, elle prête ses traits à la mère de Vanessa Paradis dans les flash-backs du film.
La consécration de sa carrière arrive lors de son interprétation marquante dans
Une Affaire De Goût, où elle joue la femme d’un homme d’affaires vampirique campé par Bernard Giraudeau. Elle est nominée pour le César du « meilleur second rôle féminin ». Florence Thomassin continue à s’installer dans le paysage audiovisuel français avec
Le Coeur Des Hommes. En 2005, elle interprète la mère du jeune héros de
Douche Froide incarné par Aurélien Recoing. La même année, elle tourne dans le film de Lionel Delplanque
Président avec Albert Dupontel. En 2006, elle partage l’affiche du
Le Grand Meaulnes avec Nicolas Duvauchelle et Jean-Baptiste Maunier. Florence Thomassin reste célèbre pour sa narration du film
Un Long Dimanche De Fiançailles.
En 2007, elle retrouve le réalisateur Marc Esposito pour la suite du Cœur des hommes,
Le Coeur Des Hommes 2 puis tourne la même année avec Stéphane Allagnon dans
Vent Mauvais.
C’est suite la réalisatrice Laurence Ferreira-barbosa qui l’engage pur tourner dans
Soit Je Meurs, Soit Je Vais Mieux.
Une autre réalisatrice s’interesse à la blonde Florence Thomassin puisqu’en 2008 elle joue dans
57 000 Km Entre Nous de Delphine Kreuter.
On la retrouve également en second rôle dans
Mesrine de Jean-François Richet en 2008.