Samuel Labarthe est accepté au Conservatoire National Supérieur d'Art Dramatique de Paris en 1983. Ses professeurs sont Michel Bouquet, Daniel Mesguich et Viviane Theophilides. Il se passionne pour le théâtre et se révèle dans des oeuvres classiques. Racine, Corneille, Edmond Rostand Tchkhov, rien ne lui résiste.
Ses premiers pas au cinéma sont difficiles. Le passage entre le théâtre et le Grand Écran est douloureux. Il obtient tout de même de beaux rôles notamment dans
Mangeclous de Moshe Mizrahi (1988), où il donne la réplique à Pierre Richard. Les années 90 sont marqués par des rôles dans des séries TV principalement.
En 1999, il joue dans
La Buche de Danièle Thompson. En 2003 il joue dans le drame de André Téchiné,
Les égarés. En 2008, il joue dans
Deux Jours A Tuer avec Albert Dupontel, puis dans
Sagan.
